Методы асептики
Протоколы и методики
Правила соблюдения стерильности
Суть правил соблюдения стерильности во многом основывается на принципах стандартной лабораторной практики (GLP). Поверхность рабочего места должна быть ровной и чистой, на ней должны находиться лишь те предметы, которые вам необходимы для работы в настоящее время. Приготовьте заранее то, что вам может понадобиться, так чтобы культуры вынимались из инкубатора на менее продолжительный срок, все манипуляции должны производиться так быстро, как это возможно, без препятствий и помех. Предметы на столе должны располагаться в зоне прямой видимости. Избегайте случайного контакта стерильных и нестерильных поверхностей. После работы оставляйте рабочее место чистым.
Ламинарный шкаф
Следует: Протирать до и после работы
Использовать минимум приборов, оборудования и материалов на рабочей поверхности
Располагать материалы и оборудование по линии прямой видимости
Не следует: Засорять ламинарный шкаф
Оставлять ламинарный шкаф в беспорядке
Контроль заражения и действия при заражении
Следует: Работать без антибиотиков
Регулярно проверять культуру, визуально невооруженным глазом и с помощью микроскопа
Упаковывать чашки Петри и многолуночные планшеты в прозрачные коробки
Не следует: Открывать зараженные флаконы в зоне работ с культурами
Пересевать инфицированные клетки
Оставлять заражение без внимания
Микоплазмы
Следует: Исследовать клетки по стандартной методике
Не следует: Пересевать зараженные клетки
Пытаться деконтаминировать («вылечить») культуры
Импорт новых клеточных линий
Следует: Получать из проверенных, заслуживающих доверие источников
Выдерживать карантин для новых линий
Проверить на микоплазмы
Подтвердить происхождение клеток
Вести записи
Не следует: Получать из источника, отдаленного от первоначального производителя культуры
Экспорт клеточных линий
Следует: Проверить на микоплазмы
Подтвердить происхождение
Послать сопроводительные документы
Тройная упаковка
Не следует: Посылать зараженные клеточные линии
Стеклянная посуда
Следует: Хранить запасы отдельно
Не следует: Использовать ту же посуду для процедур, не связанных с культивированием тканей
Флаконы
Следует: Наклонять флаконы при пипетировании
Заполнять газом при необходимости CO2-инкубирования
Быстро провентилировать при необходимости штабелирования
Не следует: Открывать слишком много флаконов одновременно
Инкубировать в CO2-инкубаторе, если нет газопроницаемой крышки
Укладывать в слишком высокие штабели
Среды и реагенты
Следует: Протирать бутылки до помещения их в ламинарный шкаф
Открывать только в боксе
Не следует: Использовать для нескольких клеточных линий
Делить с другими сотрудниками
Переливать через край
Пипетирование
Следует: Использовать пипетки с ватными пробками
Менять пипетку, если она грязная или ватная пробка стала влажной
Использовать пластик для агара
Выливать жидкости в стакан для отходов при помощи воронки
Не следует: Использовать одну и ту же пипетку для разных клеточных линий
Делить с другими людьми
Создавать аэрозоль
Слишком сильно заполнять цилиндры с обезвреживающим раствором