Ламинарный шкаф

Главным преимуществом работы в ламинарном шкафу является то, что рабочая поверхность защищена от пыли и микробного заражения постоянным стабильным потоком фильтрованного воздуха, проходящего над ней. Существуют два типа ламинарных потоков: 1) горизонтальный, при котором поток воздуха дует со стороны, противоположной оператору, параллельно рабочей поверхности, и не рециркулирует; и 2) вертикальный, при котором поток воздуха направляется сверху вниз на рабочую поверхность и либо удаляется, либо рециркулирует. В большинстве ламинарных шкафов 20% воздуха удаляется, и восполняется захватом воздуха перед поверхностью рабочего стола. Такая конфигурация создана для минимизации выхода избытка воздуха с поверхности рабочей зоны. Горизонтальный тип создает более стабильный поток воздуха и лучшую защиту стерильности культур и реагентов; вертикальный тип обеспечивает лучшую защиту для оператора.

Воздушные потоки в ламинарном шкафу. Стрелки указывают направление потоков.
(а) Горизонтальный поток. (б) Вертикальный поток

Для работы с объектами, имеющими потенциальную биологическую опасность (культуры клеток, выделенных из человека или приматов, вирусинфицированные культуры и т.д.), следует использовать MSC-боксы II класса биологической безопасности (Microbiological Safety Cabinet) с вертикальным ламинарным потоком. Наилучшую защиту от химической и радиохимической опасности обеспечивает специальный шкаф для работ по определению цитотоксичности, оборудованный угольным фильтром, очищающим рециркулирующий воздух, либо ламинарный шкаф с выведением всего потока воздуха наружу из здания через систему вентиляции. Если оператор имеет дело с известными возбудителями человека, приемлем бокс для работы с возбудителями III группы патогенности.

Эффективность работы ламинарного шкафа зависит от минимального перепада давления, при котором воздух проходит через фильтр. При возрастании сопротивления перепад давления увеличивается и поток воздуха через бокс снижается. Ниже 0,4 м/с (80 футов/мин) стабильность потока исчезает и стерильность не может поддерживаться. Перепад давления контролируется манометром, встроенным в бокс, но прямое измерение потока воздуха анемометром предпочтительнее.

При повседневной работе проверять качество фильтров необходимо примерно каждые 3–6 месяцев. Первичный фильтр для ламинарного шкафа с горизонтальным потоком можно снять (после выключения вентилятора) и вымыть при помощи мыла и воды. Встроенные первичные фильтры в ламинарных шкафах II класса биологической опасности и боксах с вертикальным потоком могут быть заменены только инженером. Эти фильтры необходимо сжечь или автоклавировать и заменить на новые.

Каждые 6 месяцев НЕРА-фильтр над рабочей поверхностью должен проверяться на предмет стабильности и однородности воздушного потока, а также дефектов и прорывов, которые определяются по местному возрастанию воздушного потока и увеличению подсчитанных частиц. Мониторинг, как правило, проводят инженеры-профессионалы на контрактной основе. В ламинарных шкафах II класса биологической опасности также необходимо производить периодическую замену НЕРА-фильтра при снижении качества очищаемого воздуха. Это также должно производиться профессиональным инженером, с соответствующей подготовкой, включающей навыки упаковки и утилизации отработанных фильтров, замены и установки новых. Если ламинарный шкаф предназначен для работы с объектами, имеющими потенциальную биологическую опасность, до замены фильтра боксы должны быть закрыты и обработаны дезинфектантом.

Регулярная проверка рабочей поверхности должна проводиться еженедельно при любом разбрызгивании и разливании сред и реагентов, рабочая зона немедленно вытирается и стерилизуется 5%-м феноловым дезинфектантом или 70%-м этанолом. Иногда разлив или разбрызгивание остаются незамеченными, поэтому необходимо периодически проверять чистоту рабочей поверхности. Тампоны, щетки, тканевые салфетки, перчатки, попавшие под рабочую поверхность, при уборке могут попасть на первичный фильтр и нарушить поток воздуха, поэтому будьте внимательны и периодически проверяйте первичный фильтр.

Предпочтительна непрерывная работа ламинарного шкафа, поскольку она позволяет сохранять рабочую зону чистой: любое разливание на фильтре или на рабочей поверхности быстро высыхает в стерильном воздухе и снижается возможность роста микроорганизмов.

Ультрафиолетовый свет также используется для стерилизации воздуха и обработки рабочей поверхности в перерывах между работами. Эффективность ультрафиолетовой обработки несомненна, поскольку свет проникает в щели, куда не может проникнуть этанол или другие дезинфицирующие агенты. Ультрафиолетовая обработка несет в себе радиационную опасность, в частности для глаз, а также может привести к образованию трещин на пластиковых панелях (например, Perspex) через 6 месяцев — 1 год при одновременном использовании этанола.

Требование безопасности. Если используется ультрафиолет, следует надевать защитные очки и закрывать все участки кожи, подвергающиеся его воздействию.