Приборы и оборудование

Все приборы, используемые в технике культуры ткани, необходимо регулярно очищать для избежания накапливания пыли и предупреждения микробного роста при случайном разбрызгивании. Заменяемые части, такие как газовые баллоны, должны также протираться перед внесением их в зону работы с культурами тканей. Во время работы следует избегать перемещения приборов и оборудования по асептической зоне.

Инкубаторы

Влажные инкубаторы являются основным источником заражения. Их следует регулярно мыть через определенные промежутки времени (еженедельно или ежемесячно, в зависимости от уровня зараженности атмосферы и частоты использования) с удалением всего содержимого, включая подносы и полки, мытьем внутренней поверхности с нетоксичным детергентом (Decon или Roccall). Следы детергента удаляют 70%-м этанолом, которому затем надо дать полностью испариться до установки полок и подносов.

Для предотвращения роста грибов фунгицидный раствор (2% Roccall или 1% сульфат меди) можно поместить в увлажняющий лоток на дно инкубатора, но эффективность фунгицидного действия ограничена поверхностями, с которыми осуществляется контакт и такая процедура не может заменить регулярной уборки. Некоторые инкубаторы снабжены высокотемпературным стерилизационным циклом, однако они редко создают надолго необходимый уровень температуры. Кроме того, такая обработка длительна, что неудобно, поскольку на это время инкубатор не используется для культивирования. Некоторые инкубаторы имеют микропоровый фильтр и ламинарный поток воздуха для ингибирования циркуляции микроорганизмов (Forma, Jencons), однако иногда лучше предпочесть небольшое увеличение времени восстановления, отсутствие вентилятора и полагаться на конвекционную циркуляцию воздуха.

Коробки для влажного инкубатора

Когда проблемы заражения во влажном инкубаторе возникают часто, можно помещать чашки Петри, планшеты и флаконы с ослабленными крышками в пластиковые коробки для сэндвичей. Коробки следует протереть до использования, внутри и снаружи, и высушить в стерильном воздухе. Когда коробки будут вынуты из инкубатора, их также обрабатывают 70%-м этанолом до того как открыть или внести в рабочую зону. Затем чашки аккуратно вынимают, внутренность коробки обрабатывают перед повторным использованием.

Культивирование в атмосфере CO2

Общепринятой практикой является ослабление крышек на флаконах при помещении их в CO2-инкубатор для проникновения газа внутрь флакона и достижения газового равновесия, однако этот прием повышает риск контаминации. Некоторые производители предлагают флаконы с газопроницаемыми крышечками, обеспечивающими быстрое достижение газового равновесия в атмосфере CO2 без риска контаминации. Альтернативным выходом является заполнение флаконов стерильной смесью газов и герметичное закрывание их. Это позволяет избежать использования газовых инкубаторов для флаконов и обеспечивает единообразие и быстрое достижение нужного состава газовой среды.