Поддержание стерильности

Соблюдение правил и методов асептики обеспечивает барьер между микроорганизмами окружающей среды вне культуры и чистой, незараженной культурой во флаконе или в чашке. Следовательно, все материалы, которые входят в непосредственный контакт с культурой, должны быть стерильны, а все манипуляции должны проводиться так, чтобы не было прямого контакта между культурой и нестерильным окружением.

Установлено, что барьер стерильности не может быть абсолютным без создания условий, которые значительно затрудняют стандартные манипуляции. Поскольку проверка соблюдения индивидуальных мер предосторожности — очень обширное и затруднительное исследование, все операции адаптируются на основе опыта и здравого смысла исследователя. Асептические методы представляют собой комбинацию действий, призванных снизить возможность инициирования. Корреляция между невыполнением какого-то шага и случаями заражения не всегда абсолютна. Оператор может отказаться от выполнения нескольких действий, прежде чем вероятность заражения возрастет так резко, что станет почти неизбежной. К тому же, причина заражения обычно многофакторна, и, следовательно, не существует очевидного простого решения проблемы. Если однажды установленные меры предосторожности постоянно соблюдаются, то случаи заражения имеют место значительно реже и легче обнаруживаются.

Хотя лабораторные условия в настоящее время в большой мере облегчают соблюдение асептики (кондиционирование и фильтрация воздуха, ламинарные шкафы ит.д.), современные лаборатории нередко переполнены персоналом, и оборудование часто используется несколькими людьми. Тем не менее, при жестком соблюдении мер предосторожности не трудно соблюдать стерильность.

Возможность заражения. Сплошная линия в верхней части графика представляет колебания в методике относительно 100% — идеальная асептическая техника. Сплошная линия в нижней части графика представляет собой колебания в уровне заражения в окружающей среде, за 0 принимается идеальная асептика. Максимум первой кривой связан с нарушениями асептической техники (не протертая по забывчивости поверхность, прикосновение пальцев к пипеткам в средней и нижней частях, контакт кончика пипетки с нестерильной поверхностью ит.д.). Пики другой кривой связаны с повышением зараженности окружающей обстановки (споровое заражение, зараженный инкубатор, зараженные реактивы ит.д.). Пока эти отклонения или пики минимальны по силе и продолжительности, два графика не перекрываются. Когда резкие колебания в асептическое методике (точечная линия наверху) совпадают с резкими отклонениями в степени зараженности окружения (пунктирная линия внизу), например как в левой части графика, где точечная и пунктирная линии пересекаются, возможность инфицирования возрастает. Если нарушения в соблюдении методов асептики продолжаются и нарастают (регрессия точечной линии в правой части графика), а зараженность окружения также повышается (повышение пунктирной кривой в правой части графика), после пересечения двух кривых вероятность инфицировании резко возрастает и приводит к частым мультиспецифичным и мультифакторным случаям заражения