Расходные материалы

Эта категория материалов включает основные предметы, такие как пипетки и контейнеры для пипеток, культуральные флаконы, ампулы для замораживания, центрифужные пробирки и стаканы (10–15 мл, 50 мл, 250 мл Sterlin, Nalge Nunc), одноразовые шприцы и иглы (21–23 G для удаления жидкости из пузырька или ампулы, 19 G для измельчения клеток), фильтры различных размеров для стерилизации жидкостей, хирургические перчатки и бумажные полотенца.

Пипетки

Пипетки должны быть продуваемого типа, с широким отверстием в носике для быстрого удаления жидкости и градуированные до носика с максимальным делением шкалы на другом конце пипетки. Можно использовать одноразовые пипетки, но они дороги и лучше сохранить их в качестве запасных на период выходных дней, когда не работает технический персонал либо на случай поломки моечной машины или стерилизатора. Пипетки многократного использования после употребления собираются в контейнеры для пипеток или лотки, по одному на рабочее место. В отношении пастеровских пипеток наилучшим образом зарекомендовали себя одноразовые пипетки, использованные пастеровские пипетки не следует помещать в общие цилиндры для пипеток, используйте для этого безопасную емкость для стеклянных отходов. Кроме того, можно пользоваться одноразовыми пластиковыми пастеровскими пипетками (Pastettes).

Контейнеры для пипеток. Стеклянные пипетки обычно стерилизуют в алюминиевых или никелированных стальных контейнерах. Квадратные в сечении контейнеры предпочтительнее круглых, поскольку они удобнее складируются и не покатятся по поверхности рабочего стола. Существуют различные варианты контейнеров с обложенными силиконовой резиной крышкой и дном во избежание скола или разбивания пипеток при манипуляциях (Thermo Electron, Bellco).

Пластиковые либо стеклянные пипетки. Во многих лабораториях привыкли к использованию пластиковых пипеток, имеющих ряд преимуществ перед стеклянными: они поступают предварительно стерилизованными, упакованными, и не вызывают опасности, связанной со сколом или разбиванием стеклянных пипеток. Кроме того, их не требуется мыть, что достаточно затруднительно, или затыкать ватными фильтрами, что утомительно. С другой стороны, они значительно дороже, и, если они упакованы индивидуально, их дольше вынимать из упаковки при употреблении. Если же такие пипетки упакованы партией, повышается риск загрязнения в случаях, когда упаковка не подразделена на секции. Пластиковые пипетки также увеличивают косвенные расходы, особенно если их необходимо дезинфицировать до утилизации.

При грубой прикидке, расходы на пластиковые пипетки на одного человека ежегодно составляют около $2000. Количество людей, таким образом, определяет выбор между стоимостью приобретения пластиковых пипеток или оплатой труда лаборанта, моющего и стерилизующего стеклянные пипетки. (При расчетах помните, что на стеклянные пипетки ежегодно расходуется $200 на человека, кроме того, требуется расход энергии на мойку и стерилизацию.)

Культуральные сосуды

Выбор культуральных сосудов определяется: 1) требуемым выходом клеток; 2) типом культуры: монослойная или суспензионная; и 3) режимом культивирования (например, будут ли образцы отбираться одновременно или через определенные промежутки времени). Покупая «все подряд», вы можете выиграть в цене, но не поддавайтесь соблазну менять продукты слишком часто, и всегда испытывайте новые образцы культуральных сосудов, прежде чем приобретать их партией.

Обратите особое внимание на этикетки: стерильно или нестерильно, для культуры тканей или не для работы с культурами тканей, качество пластика, — все эти категории хранятся отдельно. Стеклянные бутылки с плоской стороной (матрасы) могут использоваться вместо пластиковых при возможности их обработки: мытья и стерилизации. Так или иначе, более низкая цена стеклянной посуды компенсируется превосходством оптических характеристик, стерильностью, гарантией качества и общим удобством использования пластиковых флаконов. Однако одноразовый пластик сейчас составляет примерно 60% от бюджета культуральных лабораторий — даже больше, чем стоимость сывороток.

Чашки Петри менее дороги, чем флаконы, однако их содержимое более подвержено заражению и чаще разливается. В зависимости от вида работ и стерильности окружения, использование чашек Петри может быть достаточно удобно, например, при использовании в эксперименте, не связанном с ведением культуры. Чашки Петри также полезны для исследования колониеобразования, когда в конце эксперимента колонии должны быть окрашены и подсчитаны или изолированы.

Стерильные контейнеры

Для иссечения тканей потребуются чашки Петри (9 см), маленькие бутылочки (5 мл), 30-мл универсальные контейнеры или 50-мл баночки для хранения, 15- и 50-мл пробирки для центрифугирования и 1-, 2-мл пластиковые пузырьки для консервирования (Nalge Nunc) при замораживании в жидком азоте. Удобно использование пузырьков с цветовой маркировкой.

Шприцы и иглы

Несмотря на то что при стандартных манипуляциях частое использование игл и шприцов не рекомендуется (в связи с опасностью травматизации, требованиями стерильности и проблемами стресса клетки деформацией сдвига), при фильтрации в соединении с фильтрующими насадками шприцы необходимы, а иглы могут потребоваться для экстракции реагентов (лекарственных препаратов, антибиотиков или радиоизотопов) из закупоренных пузырьков.

Стерилизационные фильтры

Хотя обычно в лаборатории культивирования тканей доступно стерилизующее оборудование, в большинстве лабораторий используются стерилизующие фильтры. Целесообразно иметь в запасе несколько фильтрующих насадок различного размера, например 25-мм насадку для шприца (Pall Gelman, Millipore) и 47-мм насадку для бутылок или колбу для фильтрования (Falcon, Nalge Nunc). Хорошо иметь под рукой небольшой набор фильтров еще больших размеров.

Бумажные полотенца и салфетки

Возле каждого рабочего места или ламинарного шкафа следует обеспечить расположение бумажных полотенец и салфеток.

Дезинфектанты

Все биологические материалы после работы предпочтительно отправлять в дезинфицирующий раствор для предупреждения роста в емкостях для утилизации микроорганизмов, потенциально способных привести к заражению культур. При использовании тканей человека и других приматов обязательно помещать все биологические материалы в дезинфектант. Чаще всего используются дезинфектанты на основе хлора, которые поставляются на рынок в виде концентрата (Clorox, Chloros) или таблеток (Precept).