Общая безопасность

Здесь рассматриваются аспекты общей безопасности, которые важны для лабораторий культивирования тканей и должны использоваться в совокупности с национальными и региональными правилами и нормами безопасности.

Оператор

В сферу ответственности учреждения входит подготовка и переподготовка работников, либо определение степени подготовленности работника той работе, которую ему поручают, в т. ч. знание соответствующих лабораторных процедур. Руководитель лаборатории должен убедиться, что новые или уже работающие сотрудники близко знакомы с правилами и нормами техники безопасности. В обязанности непосредственного руководителя каждого нижестоящего по должности сотрудника входит проверка знаний и правильного выполнения всех действий, а также применения индивидуальных способов защиты, в т. ч. спецодежды в соответствующее время.

Оборудование

Руководитель подразделения должен назначить ответственного за состояние оборудования, электрическую безопасность и техническую надежность. Начальник лаборатории должен быть уверен, что все оборудование работает в соответствии со спецификацией и отвечает требованиям техники безопасности и что все сотрудники прошли обучение для работы с этим оборудованием. Отдельные риски, связанные с токсичностью паров или аэрозолированием при центрифугировании и гомогенизировании, должны быть снижены за счет дизайна оборудования или путем установки оборудования в изолирующие контейнеры.

Стеклянные и острые предметы

Наиболее частыми повреждениями при проведении работ по культуре тканей являются случайные ранения при манипуляциях с разбитым стеклом и шприцевыми иглами. В частности, опасны разбитые пипетки в моечных цилиндрах. Разбивание и скалывание пипеток происходят при вставлении с силой пипеток в цилиндр с другими пипетками. Стеклянные пастеровские пипетки не должны сбрасываться в цилиндр с обычными пипетками. Большую опасность также представляют иглы, выброшенные без соблюдения соответствующих правил вместе с обычным мусором либо проткнувшие стенку жесткого контейнера. Случайный укол использованной иглой, повреждение осколком разбившегося сосуда, либо повреждение кожи в ходе стандартных манипуляций остаются наиболее частыми видами травм, связанных с манипуляциями с потенциально биологически опасным материалом. Этим обусловлен также риск трансплантации опухоли при уколе иглой, использованной для работы с человеческими опухолями [Southam, 1958; Scanlon et al., 1965; Gugel & Sanders, 1986], хотя сообщения о таких случаях крайне редки.

Пастеровские пипетки должны выбрасываться в специальную корзину для острых и колющих предметов, а не в общую мусорную корзину, поскольку они легко разбиваются и осколки крайне опасны. При повторном использовании их необходимо складывать отдельно с большой аккуратностью. Производители предлагают одноразовые пластиковые пастеровские пипетки Kimble-Kontes; Alpha Laboratories-Pastettes, однако они имеют более толстый кончик, чем стеклянные. Избегайте использования шприцов и игл, если только они не требуются для наполнения ампул (используйте тупоконечные канюли) или отбора жидкости из запаянных пузырьков. Пользуйтесь жесткими пластиковыми или металлическими контейнерами для использованных одноразовых игл. Не старайтесь согнуть, вставить использованную иглу обратно в упаковку или как-то иначе с ней манипулировать. Обеспечьте отдельный ящик с жесткими стенками для сбора отработавших колющих предметов и разбитого стекла и не используйте его для общего мусора.

Будьте внимательны при установке пипетки в пипетирующее устройство или грушу. Выбирайте правильный размер груши, чтобы избежать риска разбивания пипетки и повреждения руки. Проверьте, чтобы носик груши издавал звук, удерживайте пипетку так близко к концу, как возможно, и, мягко надавливая, наденьте носик, удерживая пипетку так, чтобы, случайно сломавшись, она не повредила суставов руки. Хотя использование стеклянных пипеток в этом случае связано с большим риском, пластиковые пипетки тоже могут быть повреждены и сломаться, поэтому всегда проверяйте верхнюю часть каждой пипетки до использования.

Химическая токсичность

При культивировании тканей используется относительно мало химически опасных соединений, но их использование должно быть согласовано с общепринятыми мерами предосторожности. Обращайте особое внимание на образование пыли и аэрозоля в ламинарном шкафу. Детергенты, в частности те, которые используются в моечных машинах, обычно представляют собой каустик и могут раздражать кожу, глаза и легкие. По возможности, используйте жидкие детергенты в диспенсирующих устройствах, надевайте перчатки, избегайте процедур, сопровождающихся распылением детергента. Жидкие детергенты в виде концентрата предпочтительны, поскольку с ними легко обращаться и дозировать, но они дороже. Химические дезинфектанты, такие как гипохлорит, должны использоваться с соблюдением всех мер предосторожности, при этом препочтительны таблетированные формы или жидкие концентраты в емкостях с диспенсерами. Гипохлорит-содержащие дезинфектанты обесцвечивают одежду, вызывают раздражение кожи, могут вызвать коррозию в местах сварки нержавеющей стали.

При культивировании тканей используются специфические химикаты, которые требуют особого внимания: 1) диметилсульфоксид (ДМСО), является мощным растворителем и проникает через кожу, поэтому может перенести многие вещества через кожные покровы [Horita and Weber, 1964] и даже через некоторые защитные перчатки (например, через латексную или силиконовую резину, в меньшей степени через нитрильную) и 2) мутагенные, канцерогенные и цитотоксические вещества, работа с которыми должна проводиться в специальных боксах. Ламинарный шкаф II класса защиты подойдет для периодической работы с этими веществами, но для постоянного использования этих соединений может потребоваться специально разработанный бокс. Мутагены, канцерогены и другие токсичные вещества часто растворяют в ДМСО, что повышает риск их проникновения через кожу. Нитрильные перчатки обеспечивают лучшую защиту, но для отдельных реагентов следует провести испытания.

Газы

Большинство газов, используемых в культуре тканей (CO2, O2, N2) в малых количествах не оказывают повреждающего действия, но, тем не менее, могут быть опасны при ненадлежащем использовании. Они должны быть заключены в баллоны под давлением, которые затем должны соответствующим образом храниться. Если произойдет значительная утечка газа, то существует риск асфиксии (CO2, N2) или пожара (O2). В каждом случае необходимы эвакуация и максимальная вентиляция, при интенсивной утечке кислорода вызовите пожарных. В комнате, в которой хранятся запасы (CO2, N2), или в комнатах, в которые газы поступают по системе трубопровода, на уровне пола должен быть установлен показатель содержания кислорода.

Если используются стеклянные ампулы, они запаиваются на огне газовой горелки. Наибольшая осторожность требуется как для работы с пламенем, так и для предупреждения непредумышленного смешивания бытового газа и кислорода. В систему газопровода должен быть вмонтирован однонаправленный клапан, не позволяющий кислороду проникать в газопроводные трубы.

Жидкий азот

С жидким азотом связаны три основных риска: обморожение, асфиксия и взрыв. Поскольку температура жидкого азота составляет –196 °С, прямой контакт с жидкостью (при расплескивании и т. д.) или с чем-то другим, особенно металлическим, перед этим подверженным воздействию азота, представляет собой серьезную опасность. Следует надевать перчатки, достаточно толстые для обеспечения изоляции, но достаточно мягкие и гибкие, чтобы не затруднять работы с ампулами. Когда азот выкипает из морозильного оборудования при рутинных манипуляциях, для удаления паров азота достаточно работы обычной системы вентиляции; но когда азот переливают или большое количество образцов ставится в морозильник на замораживание, необходимо включать дополнительную вентиляцию. Помните, что 1 л жидкого азота образует около 700 л газа. Датчик кислорода и сигнал тревоги должны быть встроены в вентиляционную систему, так чтобы при изменяющемся составе воздуха и снижении уровня кислорода звучал аварийный сигнал и включалась дополнительная вентиляция.

Ожоги

Существует три основных источника ожогов: 1) автоклавы, стерилизационные печи и горячие поверхности; 2) манипуляции с предметами, только что вынутыми из автоклавов, печей и горячих плиток и 3) открытое пламя бунзеновской горелки при обжигании предметов. Рядом со всем нагревающимся оборудованием, в том числе горелкой, должны быть помещены предупреждающие надписи; после автоклавирования и стерилизации все предметы необходимо охлаждать. Для манипуляций с горячими предметами следует использовать теплоизолирующие перчатки.

См. также: